バイオプシー

バイオプシーは通常、妊娠を成功させる可能性を大きく高める遺伝子検査を目的として行われます。

この10年間で、生殖補助医療技術(ART)の主な目的は、妊娠を成立させることから、健康な新生児を誕生させることへと進化しました。

女性の年齢にもよりますが、ヒトの受精卵の40%から75%に異常な数の染色体が含まれている可能性があります。染色体に異常のある胚のほとんどは着床せず、着床しても流産する可能性が高いとされています。
生殖医療研究室の主な目的の一つは、刺激周期あたりの生児数を最大化することであり、患者さんが妊娠するためのコスト、時間、労力を削減することです。
この目標を達成するためには、体外受精サイクルで得られたコホートの中から生殖能力のあるものを特定するために、効率的な胚選択戦略を適用する必要があります。
胚盤胞の培養と遺伝子検査、ガラス化・加温した優性胚の移植を組み合わせることで、効率を上げることができるという証拠があります。
着床前遺伝子スクリーニングは、着床率や生児率を向上させ、ひいては多胎妊娠や流産のリスクを低減させるための臨床ツールとして利用できるのではないかと指摘する研究者もいます。

着床前遺伝子検査(PGT)は、胚移植の際に、優性の胚や特定の遺伝子疾患を持たない胚を選択するのに役立ち、体外受精の成績をさらに向上させる(1)。生検は、3日目の胚では1~2個の胚盤胞を、胚盤胞期(5~7日目)では5~10個の栄養外胚葉を採取して行います。

(1)Rodriguez-Purata J. et al.ゲノム胚スクリーニング、ガラス化、およびその後の準備された同期子宮内膜への移植によって、生殖結果は最適化される。J Assist Reprod Genet. 2016 Mar; 33(3): 401-412.

研究によると、延期移植では着床率と臨床妊娠率が高いことが示されています。これは、遺伝子スクリーニングを行った胚をガラス化し、その後、準備した同期子宮内膜に移植することで、生殖成績が最適化されることを示しています(1)。
着床前遺伝子検査(PGT)のための胚生検では,トロフェクトダーマ生検が最も一般的な方法です。胚へのレーザー照射量の低減と処置時間の短縮は、バイオプシーを行う際の施術者の主な目標です。そのため、様々な手法が開発されています。胚を固定した後、生検用マイクロピペットで5〜10個の栄養外胚葉細胞をピペット内に引き込み、細胞の接合部にレーザーショットを照射します。バイオプシー用マイクロピペットで細胞を引っ張り続けながら、機械的に細胞を引き離していく。
孵化した胚盤胞に対しては,胚をフリックする方法も提案されています。 レーザーショットを行った後、両方のマイクロピペットを重ね合わせ、生検用マイクロピペットを動かすことで、細胞から胚を保持しているマイクロピペットにテンションをかけます。フリックと呼ばれる素早い動きで、胚からバイオプシーを切り離す。
PGTプログラムの場合、安全なバイオプシー技術を実施することが重要ですが、胚の将来の生存率を保証する遺伝子結果を得るための十分な時間を確保するために、成功したガラス化手順を実施することが不可欠です

 

孵化した胚盤胞に対しては,胚をフリックする方法も提案されています。 レーザーショットを行った後、両方のマイクロピペットを重ね合わせ、生検用マイクロピペットを動かすことで、細胞から胚を保持しているマイクロピペットにテンションをかけます。フリックと呼ばれる素早い動きで、胚からバイオプシーを切り離す。
PGTプログラムの場合、安全なバイオプシー技術を実施することが重要ですが、胚の将来の生存率を保証する遺伝子結果を得るための十分な時間を確保するために、成功したガラス化手順を実施することが不可欠です

 

遺伝子検査が失敗する割合は低いのですが、これは診断されなかった胚盤胞を再度バイオプシーすることを意味します。検査を繰り返すには、2回目の生検と2回目のガラス化が必要になります。一方で、すでに凍結保存されている生検していない胚の遺伝子検査を依頼して、2倍体の胚を移植することができる患者さんもいます。この場合、1回の生検を行ったとしても、2回の凍結保存が必要となります。

以前にガラス化した胚を温めてから生検し、再凍結することで、胚の生存率と臨床的な妊娠率が維持されることが科学的に証明されています(2)。さらに、胚盤胞の再バイオプシーでは、高い確率で2倍体の結果が得られ、良好な妊娠成績が得られることから、この戦略は、胚のコホート全体の2倍体の状態を知りたいすべての患者さん、特に移植可能な他の胚を持たない患者さんに検討していただきたいと思います(3)。

(1) Rodriguez-Purata J. et al.ゲノム胚スクリーニング、ガラス化、およびその後の準備された同期子宮内膜への移植によって、生殖結果は最適化される。J Assist Reprod Genet. 2016 Mar; 33(3): 401-412.

(2) Wilding M. et al.凍結保存された胚のPGT-Aのための解凍、バイオプシー、再凍結の戦略。事実の見方 Vis Obgyn.2019, 11 (3): 223-227

(3) Neal S.A. et al. 次世代シーケンサーを用いた異数性のための着床前遺伝子検査(PGT-A)で結論の出ない報告がなされた場合:再生検後の診断結果と臨床転帰。JARG. 2019, 36:2103-2109.

バイオプシーディッシュの設置

バイオプシーディッシュの設置は、Gamete Bufferの液滴をHypure オイルで覆ってセットします。 胚をホールディングピペットでしっかりと固定しながら、バイオプシーピペットを使って生検した細胞を正確に取り出します。

透明帯を開くにはさまざまな方法があります。    

– PZDピペットで機械的に  

– 化学的には酸の溶液で。 

– レーザーショット。  

北里バイオプシーピペット

胚芽や栄養外胚葉を除去する際に細胞膜を保護し、生検された胚へのダメージを最小限に抑えるために、先端が平らに磨かれた特別なデザインになっています。

北里PZDピペット

胚を傷つけることなく、透明帯を容易に切り取ることができるように、先端が非常に鋭く、細く設計されています。

 

体外受精ライフサイクル

北里は、体外受精(IVF)のライフサイクルの各ステージにおいて、最大限の成果を引き出すための高品質な製品を幅広く取り揃えています。各体外受精の手順に関連する製品については、こちらをご覧ください。

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